對(duì)于植物的三倍體乃至多倍體,我們都不陌生。在中學(xué)生物課上都學(xué)過(guò)三倍體無(wú)籽西瓜的培育過(guò)程:先用秋水仙素處理獲得四倍體母本,繼而與二倍體父本雜交得到不育的三倍體后代,這就是無(wú)籽瓜了。
我們平常吃的香蕉也是三倍體,它是其野生祖先“小果野蕉”在自然條件下偶然形成的。小果野蕉既可以無(wú)性繁殖也可以開花結(jié)種子進(jìn)行有性繁殖,人類便利用了這一點(diǎn),通過(guò)無(wú)性繁殖的手段將野生的三倍體保留下來(lái),最終得到了香甜可口又沒有一大堆硬籽的香蕉。
當(dāng)然,除了三倍體外,細(xì)胞中有更多套染色體的生物也是有的。
我國(guó)最重要的糧食作物之一小麥,其祖先就是在大約50萬(wàn)年前與山羊草屬的植物發(fā)生天然雜交,成為了四倍體,到了距今約8000年前,四倍體小麥又與另一種野生“親戚”發(fā)生了天然雜交,最終形成了六倍體的后代,也就是目前世界范圍內(nèi)廣泛栽培的普通小麥。
但是對(duì)于動(dòng)物的多倍體,似乎就比植物的要稀罕得多了。
近年來(lái),隨著三倍體轉(zhuǎn)基因三文魚先后在加拿大和美國(guó)通過(guò)批準(zhǔn)上市,以及個(gè)大味美的三倍體牡蠣(生蠔)在網(wǎng)絡(luò)上的熱銷,動(dòng)物的三倍體養(yǎng)殖技術(shù)也逐漸進(jìn)入了大眾的視野。
人們培育三倍體水果主要是為了得到無(wú)籽的果實(shí),那培育三倍體的動(dòng)物是為了什么呢?
三文魚和牡蠣都是雌雄異體、異體受精的動(dòng)物,不像香蕉一樣進(jìn)行無(wú)性繁殖,那么,三倍體的動(dòng)物是怎么培育的呢?
由于高等動(dòng)物幾乎不可能無(wú)性繁殖,那些偶然產(chǎn)生的三倍體動(dòng)物,難以被保留下來(lái)。因此,人們無(wú)法像當(dāng)初培育香蕉一樣,從自然界獲得三倍體的高等動(dòng)物?,F(xiàn)在被成功規(guī)?;B(yǎng)殖的三倍體動(dòng)物,都是通過(guò)各種人工手段誘導(dǎo)得到的。
在1932年,德國(guó)科學(xué)家Fabius Gross通過(guò)對(duì)剛受精的卵細(xì)胞施以低溫,成功誘導(dǎo)一種名為Artemia salina的甲殼綱動(dòng)物產(chǎn)生了三倍體后代。隨后,同樣的方法被科學(xué)家們嘗試用于蠑螈、鮭魚,甚至小鼠。
1959年,牛津大學(xué)的印度籍科學(xué)家Har Swarup成功人工誘導(dǎo)得到了三倍體的三棘刺魚(一種小型近海硬骨魚類)。之后,又經(jīng)過(guò)幾十年的探索和研究,獲得三倍體動(dòng)物的方式逐漸增加,人們也終于成功地在鯉魚、鰱魚、鳙魚、鯽魚、虹鱒、大黃魚、真鯛、黑鯛、團(tuán)頭魴、牙鲆、羅非魚等多種魚類的育種中獲得三倍體或四倍體。
而貝類的三倍體研究則是從上世紀(jì)80年代開始的,1981年,幾位美國(guó)科學(xué)家采用化學(xué)誘導(dǎo)的方法成功獲得了三倍體美洲牡蠣?,F(xiàn)在,人們已經(jīng)在長(zhǎng)牡蠣、悉尼巖牡蠣、僧帽牡蠣以及市場(chǎng)上最常見的太平洋牡蠣等多種牡蠣,以及海灣扇貝、硬殼蛤、皺紋盤鮑、雜色鮑等貝類的三倍體育種上取得了成功。
目前,動(dòng)物的三倍體育種技術(shù)仍然主要在水產(chǎn)養(yǎng)殖和觀賞魚領(lǐng)域開展。
為什么要培育三倍體動(dòng)物?
首先,正常的二倍體動(dòng)物在性成熟階段和繁殖季節(jié),都會(huì)把許多能量用于性腺發(fā)育和產(chǎn)生精卵,有些動(dòng)物在繁殖期死亡率也會(huì)有所上升。而三倍體動(dòng)物由于具有不育的特性,性腺將不會(huì)發(fā)育成熟,用于性腺發(fā)育的這部分能量將被節(jié)約下來(lái)用于生長(zhǎng)。這樣一來(lái),三倍體動(dòng)物往往生長(zhǎng)速度更快、個(gè)頭更大,也避免了繁殖期生長(zhǎng)停滯、肉質(zhì)下降和死亡率升高的問(wèn)題出現(xiàn),具有極高的經(jīng)濟(jì)價(jià)值。
另一方面,水產(chǎn)養(yǎng)殖往往依賴海洋、湖泊等自然水體,所養(yǎng)殖的動(dòng)物是人工培育的雜交種或引入的外來(lái)物種。一旦發(fā)生圍欄損壞、洪水倒灌等情況,導(dǎo)致養(yǎng)殖個(gè)體逃逸進(jìn)入自然環(huán)境,就會(huì)污染本土物種的基因庫(kù),或形成新的種群與野生的本土物種競(jìng)爭(zhēng),對(duì)生態(tài)環(huán)境造成惡劣的影響。三倍體養(yǎng)殖技術(shù)很好地解決了這一問(wèn)題,養(yǎng)殖個(gè)體即使逃逸也不具有繁殖能力,不會(huì)污染基因庫(kù),也不會(huì)產(chǎn)生大量后代與本土物種爭(zhēng)奪生存資源。
最后,人們可以通過(guò)種間雜交來(lái)獲得兼具兩個(gè)物種優(yōu)勢(shì)的雜交品種,但有些雜交二倍體的生存率非常低,但雜交三倍體由于具有某一方親本的兩套染色體,生存能力顯著提高。在這種情況下,就可以通過(guò)誘導(dǎo)雜交三倍體,來(lái)得到品質(zhì)優(yōu)良的雜交養(yǎng)殖品種。
三倍體動(dòng)物是怎么培育出來(lái)的?
人們掌握的獲得三倍體動(dòng)物的方法有很多,雖然操作起來(lái)比較麻煩,具備一定的專業(yè)性,但其原理卻并不復(fù)雜。
最直接的辦法是遠(yuǎn)緣雜交,早在1965年,就有科學(xué)家發(fā)現(xiàn)了脊椎動(dòng)物可以通過(guò)雜交產(chǎn)生三倍體后代。目前,人們已經(jīng)成功通過(guò)草魚×鳙魚、鯽魚×鯉魚、團(tuán)頭魴×鯽魚等組合獲得了三倍體或四倍體的魚。
物理學(xué)方法是在魚類三倍體育種中應(yīng)用最為廣泛的,主要包括冷休克、熱休克和靜水壓休克。
在魚類卵細(xì)胞的正常形成過(guò)程中,初級(jí)卵母細(xì)胞的染色體復(fù)制成四套后,需要進(jìn)行兩次減數(shù)分裂。第一次有絲分裂時(shí),形成一個(gè)大的次級(jí)卵母細(xì)胞和一個(gè)小的第一極體,各有兩套染色體。隨后第一極體被排出,魚卵中余下的染色體仍是兩套。第二次成熟分裂停留在分裂中期,雄魚排出的精子進(jìn)入魚卵后,可激活魚卵繼續(xù)完成分裂,排出含有一套染色體的第二極體,最后剩下一套來(lái)自雌魚的染色體和一套來(lái)自雄魚的染色體。
如果在減數(shù)分裂過(guò)程中調(diào)節(jié)水溫或水壓,只要起始時(shí)間、持續(xù)時(shí)間和處理強(qiáng)度掌握得當(dāng),就有可能干擾正常的分裂,導(dǎo)致第二極體不排出或染色體重復(fù)加倍,最終獲得三倍體或四倍體魚。
化學(xué)藥物處理也同樣能干擾減數(shù)分裂過(guò)程,就像秋水仙素誘導(dǎo)西瓜產(chǎn)生四倍體一樣。一些化學(xué)藥物例如咖啡因,可以破壞細(xì)胞中的紡錘絲,使得核分裂被中止;還有一些藥物例如細(xì)胞松弛素B,能阻礙細(xì)胞表層收縮環(huán)、溝的形成,導(dǎo)致細(xì)胞質(zhì)無(wú)法正常分裂。
在貝類的三倍體育種中,高溫結(jié)合咖啡因、細(xì)胞松弛素B、6-二甲氨基嘌呤等化學(xué)藥物處理,是常用的誘導(dǎo)方法。
當(dāng)然,就像吃了無(wú)籽西瓜、香蕉并不會(huì)導(dǎo)致人體患病或不孕不育一樣,經(jīng)過(guò)充分研究、測(cè)試,最終得以通過(guò)檢測(cè)的三倍體魚類和貝類,對(duì)人體健康也沒有危害,它們的安全性絕不比傳統(tǒng)的二倍體魚和貝類差。否則,三倍體轉(zhuǎn)基因三文魚也不會(huì)通過(guò)挑剔的美國(guó)食品藥品監(jiān)督管理局(FDA)的重重檢測(cè),最終進(jìn)入美國(guó)零售市場(chǎng)啦!
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